کلونینگ هورمون رشد ماهی قرمز

هورمون رشد باعث تحریک و تکثیر سلول ها در انسان و حیوانات می شود. این هورمون یک پلی پپتید تک زنجیره ای است که وزن مولکولی در حدود 22 کیلو دالتون دارد و دارای تعداد تقریبی 191 اسید آمینه است که در سلول های سوماتوتروف واقع در بال جنبی غده هیپوفیز پیشین ساخته شده و ترشح می گردد. هدف از انجام پروژه حاضر شبیه سازی ژن هورمون رشد ماهی قرمز به عنوان یک نمونه قابل دسترس از ماهیان است تا پس از کلونینگ صحیح این ژن بتوان در تحقیقات بعدی بیان آنرا در یک سیستم بیان یوکاریوتی بررسی نموده و متعاقب آن اثرات آنرا در میزان رشد این نمونه از ماهیان در طول دور? تکثیرشان مطالعه کرد. در این پروژه پس از جداسازی بافت هیپوفیز از ماهی، استخراج rna total از بافت هیپوفیز انجام گرفت و پس از اطمینان از سلامت rna های استخراج شده روی ژل الکتروفورزی، از روی mrna مربوطه، cdna ژن هورمون رشد با استفاده از آنزیمreverse transcriptase ساخته شد. cdna ژن هورمون رشد سپس توسط متد pcr تکثیر و ناحی? کد کنند? ژن مزبور جداسازی گردید. قطعه حامل ناحی? کد کننده آنگاه در وکتور کلونینگ پلاسمیدی قرار گرفته و از طریق ترانسفورماسیون شیمیایی، dna نوترکیب به داخل یک سلول میزبان باکتریایی انتقال یافت. نتایج مقدماتی ما نشان دهند? بیان آنالتیک ژن هورمون رشد ماهی قرمز در سلول میزبان کلونینگ است. آزمایشات تکمیلی دیگر در آنالیز پروتئین تولید شده و بهبود کیفیت محصول تولیدی در حال انجام اند